Citometría de flujo con fluorescencia: el siguiente paso en el análisis de partículas de orina
Análise rápida e sensível do sedimento de urina: conte com milhares de partículas contadas e classificadas a partir de urina nativa. A análise da urina nativa sem centrifugação ou pré-tratamento evita fontes comuns de erro e torna a análise ainda mais padronizada.
Marcação por fluorescência
A marcação por fluorescência é a primeira etapa do processo de medição. Neste caso, são usados fluorocromos específicos para marcar as estruturas nucleares (ADN) e da superfície (membrana) das partículas numa amostra. Os fluorocromos são escolhidos com base na sua capacidade de emitir luz fluorescente quando são excitados por um determinado comprimento de onda da luz. Isso permite identificar e medir as características de cada partícula, permitindo determinar um portfólio mais amplo de parâmetros clínicos.
Focagem hidrodinâmica
A focagem hidrodinâmica é a segunda etapa. Nesta etapa, um reagente "sheath flow" é usado para separar e alinhar as partículas na amostra. O reagente "sheath flow" tem a função de envolver as células de forma única e alinhada para que possam ser analisadas de maneira eficiente à medida que passam no feixe de laser. Tal garante que cada partícula seja medida individualmente e com exatidão, levando a resultados mais precisos.
Caracterização de partículas por varrimento a laser
A caracterização de partículas por varrimento a laser é a terceira etapa. Nesta etapa, cada partícula passa pelo feixe de laser de 488 nm, que excita as partículas individuais e pode separar as células usando quatro sinais diferentes. Os sinais recolhidos pelos detetores fornecem informações sobre o tamanho, forma, despolarização e intensidade de fluorescência de cada partícula.
Impressões digitais únicas
Os padrões de sinal de luz detetados são traduzidos em impressões digitais fingerprints individuais, que permitem identificar cada partícula e atribuí-la ao parâmetro relevante. Isso leva à quantificação de cada parâmetro, fornecendo informações detalhadas sobre as partículas na amostra.
Scattergram
Finalmente, os sinais recolhidos de uma medição são atribuídos aos parâmetros correspondentes e resumidos em scattergrams. Cada Scattergram representa os sinais de uma amostra para um ou mais parâmetros, proporcionando uma análise abrangente das partículas e das suas características. Com a citometria de fluxo e fluorescência, é possível analisar grandes números de células num curto espaço de tempo, fornecendo informações detalhadas sobre populações de células e as suas características. Essas informações podem ser usadas para apoiar a tomada de decisões clínicas.
