A aplicação opcional de Líquidos Biológicos ‘BF’
Analisar líquidos biológicos nos analisadores hematológicos de cinco componentes da Sysmex consiste numa reação citoquímica das células com reagentes específicos e patenteados, seguida por análise de citometria de fluxo e fluorescência, e medição de impedância com focagem hidrodinâmica.
A aplicação de Líquidos Biológicos utiliza o canal WDF e o canal RBC/PLT num modo específico para líquidos biológicos. Fornece contagens totais de células nucleadas e de leucócitos, com diferenciação de leucócitos em células mononucleares e polimorfonucleares, além de uma contagem de eritrócitos. A aplicação de Líquidos Biológicos é adequada para fluidos cerebrospinais, serosos e sinoviais, bem como para CAPD (Diálise Peritoneal Ambulatorial Contínua), sem necessidade de pré-tratamento das amostras.
A contagem de leucócitos (WBC-BF) é de significado diagnóstico importante, especialmente em LCR, enquanto a contagem total de células nucleadas (TC-BF) desempenha principalmente um papel em outros líquidos, tais como o fluido pleural. Ambos os parâmetros estão disponíveis após cada medição. O TC-BF inclui todas as células nucleadas, tais como macrófagos, células mesoteliais, células tumorais e leucócitos.
Análise de Líquidos Biológicos com citometria de fluxo e fluorescência
O reagente de lise inicialmente perfura as membranas celulares, deixando as células em grande parte intactas. O marcador de fluorescência então marca os ácidos nucleicos intracelulares (principalmente RNA), sendo que a intensidade do sinal de fluorescência resultante é diretamente proporcional ao conteúdo de ácido nucleico.
A amostra é então analisada usando citometria de fluxo e fluorescência. Os sinais de medição relacionados à dispersão para a frente (FSC), dispersão lateral (SSC) e fluorescência lateral (SFL) são analisados e representados em scattergrams 2D, que exibem as células de acordo com o seu conteúdo de ácido nucleico e sua estrutura interna, ou adicionalmente num scattergram 3D (apenas XR-Series). As células com propriedades citoquímicas semelhantes ficam dentro da mesma área no scattergram e podem ser separadas usando um algoritmo de software avançado.
Devido ao elevado conteúdo de RNA, as células imaturas ou outras que não são células sanguíneas e também são muito maiores (tais como as células mesoteliais), aparecem com um sinal de fluorescência fortemente aumentado. Como resultado, elas são detetadas no âmbito da análise BF e até podem ser contadas.
Os eritrócitos e as partículas não celulares não aparecem no scattergram porque não possuem ácidos nucleicos e, portanto, não são marcados pelo reagente. Isso reduz os possíveis fatores de interferência e possibilita uma medição específica e sensível, tal como é necessário em concentrações celulares baixas.
Os analisadores da Série XR utilizam sinais da dispersão da luz laser em dois ângulos (FSC e SSC) e sinais de fluorescência (SFL). Cada célula sanguínea detetada possui coordenadas individuais x, y, z representando os sinais de FSC, SSC e SFL, respetivamente. Através de algoritmos avançados, a Série XR é capaz de identificar e agrupar tipos de células, especialmente células anormais, com base no tamanho, complexidade interna e conteúdo de DNA/RNA. O resultado dessa análise é refletido nos scattergrams 3D, que podem ser rodados em todas as direções para inspecionar as populações celulares a partir de diferentes ângulos.
Benefícios para laboratórios e profissionais clínicos
- A aplicação de Líquidos Biológicos da Sysmex para analisadores hematológicos oferece medição automatizada de diferentes líquidos biológicos a qualquer momento (24/7) - de forma simples, rápida e padronizada - sem necessidade de pré-tratamento das amostras. Isso também implica uma redução no número de contagens manuais demoradas em câmaras.
- A aplicação de Líquidos Biológicos está disponível opcionalmente nos analisadores das Séries XN-L, XN e XR. O tempo de análise é apenas de 90 segundos (XN e XR) ou 120 segundos (XN-L).
- O aumento no volume de contagem no modo BF - duas ou três vezes em comparação com uma câmara de contagem de 3,2 µL - garante uma excelente reprodutibilidade dos resultados, dentro da faixa clinicamente relevante e independente do operador.
- Um amplo portfólio de regras de validação específicas para diferentes líquidos biológicos (disponíveis opcionalmente com o Extended IPU) oferece um elevado grau de padronização e segurança, mesmo aos fins de semana e durante os turnos da noite.
- A medição do LCR no perfil BF pode rapidamente auxiliar aos clínicos a excluir ou confirmar a meningite e sua possível causa, com base na contagem de leucócitos (WBC-BF) e sua diferenciação em células polimorfonucleares (PMN) e mononucleares (MN).
- As publicações* sustentam que a informação sobre a ausência de células corporais altamente fluorescentes** (HF-BF**; inclui macrófagos, células mesoteliais ou células tumorais), pode auxiliar aos clínicos na exclusão de condições malignas em amostras de fluidos serosos.
- Analisar um líquido de diálise peritoneal no modo BF pode, com a ajuda da determinação de eosinófilos** (EO-BF**), auxiliar aos clínicos na diferenciação entre peritonite e uma reação alérgica.
* Para referências a publicações independentes, por favor, visite o nosso publications ou entre em contato com o representante local da Sysmex.
** Parâmetro de investigação
Documentos para download
Atendendo a diversas demandas diagnósticas: contagem total de células nucleadas e de leucócitos, com diferenciação de leucócitos em células mononucleares e polimorfonucleares.
Este artigo SEED destina-se a explicar as descobertas centradas na contagem e diferenciação de células para fluidos pleurais, ascíticos, cerebrospinais, sinoviais e também para CAPD. Tradicionalmente, as contagens de fluidos corporais são realizadas por contagem manual sob um microscópio, usando um hemocitômetro, mas os laboratórios agora têm a opção de automatizar os seus processos manuais usando analisadores automatizados de hematologia ou urinálise. Este artigo SEED resume as vantagens e desvantagens da hemocitometria e dos analisadores Sysmex, e explica brevemente o modo XN-BF.