Analisar os diferenciais de leucócitos (WBC) nos analisadores hematológicos da Sysmex consiste numa reação citoquímica das células com reagentes específicos e patenteados, seguida por uma análise de citometria de fluxo e fluorescência.

A aplicação de diferencial de leucócitos utiliza informações de dois canais de análise (WDF e WNR), e fornece contagens absolutas e percentuais das subpopulações de leucócitos, como NEUT, LYMPH, MONO, EO, BASO e granulócitos imaturos (IG). Para além disso, provê informações de sinalização em casos de anomalias, permitindo a deteção de resultados anormais na contagem sanguínea.

Com a licença opcional para os “Extended Inflammation Parameters”, parâmetros clínicos avançados adicionais ficam disponíveis para oferecer suporte diagnóstico aprimorado após a exclusão duma doença.

Análise de leucócitos com citometria de fluxo e fluorescência

O reagente de lise especialmente desenvolvido perfura inicialmente as membranas celulares, deixando as células em grande parte intactas. O marcador de fluorescência então marca os ácidos nucleicos intracelulares (principalmente RNA). A composição desses dois reagentes provoca uma reação fraca com os leucócitos, de modo que quase toda a sua estrutura celular permanece intacta. Isso significa que é alcançada uma separação ótima das subpopulações de leucócitos.

A amostra é então analisada usando citometria de fluxo e fluorescência. Os sinais de medição relacionados à dispersão frontal (FSC), dispersão lateral (SSC) e fluorescência lateral (SFL) são analisados e representados em diferentes scattergrams de dois eixos, ou alternativamente num scattergram tridimensional (apenas na Série XR). As células com propriedades citoquímicas semelhantes ficam dentro da mesma área no scattergram e podem ser separadas usando um algoritmo de software avançado.

Os scattergrams WNR (à esquerda) e WDF (à direita) mostrando uma distribuição celular normal.

Scattergram WDF

Loading 3D-Element

A Série XR utiliza sinais provenientes da dispersão de luz laser em dois ângulos (FSC e SSC) e sinais de fluorescência (SFL). Cada célula sanguínea detetada possui valores individuais de coordenadas x, y, z, representando os sinais de FSC, SSC e SFL, respetivamente. Utilizando algoritmos avançados, a Série XR é capaz de identificar e agrupar tipos celulares (especialmente células anormais), com base no seu tamanho, complexidade interna e conteúdo de DNA/RNA. O resultado dessa análise é refletido nos scattergrams 3D, que podem ser rodados em todas as direções para inspecionar as populações celulares a partir de diferentes ângulos.

A informação resultante da composição da membrana e o RNA citoplasmático (fluorescência), o tamanho da célula (dispersão frontal) e a estrutura intracelular (dispersão lateral) é analisada com algoritmos exclusivos que proporcionam uma deteção sensível de células reativas, imaturas ou patológicas numa amostra de sangue.

Benefícios para laboratórios e profissionais de saúde

A marcação 3D DIFF das Séries XR e XN deteta com grande sensibilidade anormalidades nos leucócitos, graças ao reconhecimento especial da forma dos aglomerados de subpopulações. Os estudos revelaram uma excelente sensibilidade e especificidade na deteção dos analisadores da Série XN em diversas populações de doentes para blastos, linfócitos anormais e atípicos.
O parâmetro IG já permitiu a muitos dos nossos clientes reduzir consideravelmente o número de esfregaços - dependendo dos valores limite individuais. Também pode utilizar este parâmetro para controlar a taxa de esfregaços no seu laboratório.
Se a contagem de leucócitos (WBC) for muito baixa e não for possível obter uma contagem de neutrófilos, as amostras serão automaticamente reavaliadas no modo específico de 'Low WBC' como teste de reflexo. Com um volume de contagem aumentado, a confiabilidade dos resultados aumenta para todos os parâmetros de diferenciação de WBC.
As Séries XR e XN da Sysmex oferecem um amplo portfólio de parâmetros opcionais e mensagens que fornecem informações valiosas para apoiar aos clínicos no tratamento, tais como a quantificação de linfócitos ativados e neutrófilos. Os parâmetros RE-LYMP e AS-LYMP, que avaliam o número de todos os linfócitos reativos e linfócitos sintetizadores de anticorpos respetivamente, fornecem informações adicionais sobre a ativação celular da resposta imunológica inata e adaptativa. Além disso, a granularidade e reatividade dos neutrófilos (NEUT-GI e NEUT-RI, respetivamente) ajudam na diferenciação entre infeções bacterianas precoces e avançadas.

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