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Linfoma difuso de grandes células B: um tipo comum de linfoma

O linfoma difuso de grandes células B (LDGCB) é o tipo mais comum de linfoma não Hodgkin, representando cerca de 25% dos casos [1]. É também a sexta causa mais comum de morte por cancro [2]. O LDGCB apresenta-se tipicamente com linfócitos anómalos que têm núcleos grandes, citoplasma basófilo e uma elevada taxa de proliferação [3].

Normalmente utiliza-se a imunofenotipagem por citometria de fluxo para classificar a doença.

Deteção de linfócitos anómalos com o analisador XR-Series

Os linfócitos anómalos têm determinadas características que permitem diferenciá-los das células normais "saudáveis". Uma caraterística bem descrita dos linfócitos anómalos é a sua composição alterada da membrana com um elevado teor de lípidos [4] e o facto de terem mais ADN aparente quando comparados aos linfócitos normais, uma vez que se proliferam rapidamente [5]. Os analisadores XR-Series da Sysmex tiram partido destas características especiais das membranas celulares para identificar a célula, utilizando canais específicos e reagentes patenteados.

No canal de medição WDF, o reagente de lise reage de forma bastante suave e deixa a estrutura interna das células praticamente intacta, permitindo que o marcador fluorescente entre nas células e marque principalmente o ARN no seu interior. Consoante o sinal de fluorescência dos agregados de células, são acionados marcadores específicos, pré-classificando a amostra em negativa, reativa, potencialmente maligna ou negativa e potencialmente maligna ou reativa. Com base nesta pré-classificação no canal de medição WDF, são ativados os marcadores "Blasts/Abn Lympho?" (blastos/linfócitos anómalos?) ou a combinação "Blasts/Abn Lympho?" e "Atypical Lympho?" (linfócitos atípicos?). Estas originam uma medição automática do reflexo no canal de medição WPC.

O reagente de lise do canal de medição WPC, por outro lado, tem um efeito mais forte sobre os lípidos da membrana do que os utilizados no canal WDF. Além disso, as células anómalas, devido à sua composição específica da membrana e às membranas facilmente permeáveis, permitem um maior acesso ao seu ADN nuclear [5], que é então corado pelo marcador fluorescente WPC específico. Quanto maior for o grau de perfuração da membrana, maior será a fuga de conteúdo celular pelos poros, provocando o encolhimento da célula. Por conseguinte, os linfócitos anómalos apresentarão um sinal de tamanho mais pequeno e um sinal de fluorescência mais elevado [5]. As células imaturas, como os blastos ou as células progenitoras hematopoiéticas, por outro lado, têm um teor lipídico mais baixo e são mais resistentes à lise [4]. Por conseguinte, emitirão sinais de fluorescência mais baixos e permanecerão maiores.

A combinação das informações provenientes de ambos os canais de medição - WDF e WPC - nos analisadores XR-Series permite diferenciar entre células negativas, reativas ou suspeitas de malignidade [6].

Fig. 2 A presença de linfócitos anómalos pode ser observada no diagrama de dispersão WPC do analisador. 

O esfregaço de sangue mostrou linfócitos anómalos de aspeto tipo blasto, alguns dos quais com núcleo fissurado.

Os resultados de imunofenotipagem subsequentes confirmaram o diagnóstico de suspeita de linfoma difuso de grandes células B. Além disso, o doente desenvolveu uma infeção por Streptococcus parasanguinis, que foi confirmada por uma hemocultura.